Рабочие листы
к вашим урокам
Скачать
1 слайд
Различные типы ФКУ и методы их молекулярной диагностики.
2 слайд
Фенилкетонурия – частое врожденное нарушение метаболизма аминокислот, в основе которого лежит дефицит печеночного фермента фенилаланингидроксилазы, осуществляющего превращение фенилаланина.
Основным клиническим симптомом фенилкетонурии, без своевременного начатого лечения, является задержка психо-речевого и физического развития и, как следствие, слабоумие, ведущее к тяжелой психической инвалидности.
3 слайд
Распространенность ФКУ в различных популяциях мира, по данным массового скрининга
Популяция
Частота носителей
Частота заболевания
Авторы
Турция
1:26
1:2600
Ozalp et al., 1986
Ирландия
1:33
1:4500
DiLella et al., 1986
Восточная Европа
1:50
1:10 000
Scriver & Kaufman, 2001
Япония
1:200
1:143 000
Aoki & Wada, 1988
Финляндия
1:225
1:200 000
Scriver & Kaufman, 2001
4 слайд
ФЕНИЛКЕТОНУРИЯ
Классическая
Повреждении в гене фенилаланингидроксилазы (PAH)
98%
Атипичная
Повреждения в генах синтеза и обмена тетрогидробиоптерина (ВН4) (PTS, QDPR и др.)
2%
5 слайд
6 слайд
Частота встречаемости наиболее частых мутаций среди больных
в мире
(http://data.mch.mcgill.ca/pahdb)
в Европейских популяциях (Zschocke J., 2003 )
42%
63%
7 слайд
Система регистрации наиболее частых мутаций
R252W
R261Q
Norm
IVS12+1g>a
Norm
R408W
11ex Norm
IVS10-11g>a
3ex Norm
I65T
P281L
7ex Norm
R158Q
5ex Norm
1 2 3
А) одна пара праймеров и две эндонуклеазы рестрикции
Б) две пары праймеров и одна эндонуклеаза рестрикции
8 слайд
Структура выборки (N=302)
9 слайд
Частота встречаемости наиболее частых мутаций в Российских популяциях
79,1%
10 слайд
Частота распространения наиболее частых мутаций в мире, в Европейских популяциях и в исследуемых российских популяциях больных ФКУ
11 слайд
.
Фрагмент сиквенса экзона 7 гена РАН, образца ДНК больного ФКУ из Воронежской области. Замена G на Т в 781 основании гена РАН приводящая к преждевременному стоп кодону в 261 кодоне (Arg261Stop). Стрелкой обозначена мутация R261X.
SSCP-анализ экзона 7 гена PAH
Стрелкой обозначено изменение
электрофоретической
Подвижности соответствующее
мутации R261X.
12 слайд
экзон 1
экзон 3
экзон 2
экзон 5
экзон 9
экзон 10
экзон 11
экзон 12
экзон 13
экзон 7
экзон 8
экзон 6
экзон 4
p.F39del
L48S
IVS2+5g>a
IVS2-13t>g
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
IVS4+5g>t
del 875-882nt
A132V
A165V
R243X
E256D
R261X
E280K
IVS7+1g>a
L348V
S349P
IVS10-14c>g
E390D
IVS11+1g>c
R408Q
Y414C
I421N
Структура гена PAH и локализация
обнаруженных мутаций в гене PAH
Суммарная информативность 87,2%
13 слайд
Полиморфные маркеры внутри и непосредственной близости от гена PAH
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
STR
VNTR
PAH 26 STR
76kb
VNTR
STR
PAH 26 STR
Гетерозиготность 75%
Гетерозиготность 72%
Гетерозиготность 70%
14 слайд
Исследование в гене PAH
15 слайд
Синтез и метаболизм тетрагидробиоптерина
PTPS
DHPR
PAH
Гуанозинтрифосфат (GTP)
Дигидроптеринтрифосфат
6-пировоилтетрагидроптерин
Тетрагидробиоптерин
q-Дигидроптерин
4а-карбиноламин
Фенилаланин
Тирозин
Тирозин
Дофамин
Триптофан
5-ОН-Триптофан
Серотонин
Птерин-
16 слайд
Ген QDPR локализован на хромосоме 4 в районе p15.3
Ген PTS расположен
хромосоме 11 в районе q22.3-23.3
PTS
GCH1
PCBD
QDPR
17 слайд
AGT
TAG
2,7kb
1,9kb
10kb
2,5kb
1,7kb
экзон 1
экзон 2
экзон 3
экзон 4
экзон 5
экзон 6
A135D
экзон 7
2,7kb
Структура гена QDPR и локализация обнаруженных мутаций в гене QDPR
18 слайд
Структура и локализация обнаруженных мутаций в гене PTS
2,0kb
1,5kb
0,4kb
2,5kb
0,2kb
экзон 1
экзон 2
экзон 3
экзон 4
экзон 5
экзон 6
AGT
TAG
N72K
V59G
S32G
IVS5-1g>a
T106M
g.7068G>A
19 слайд
20 слайд
Больной ВН4-зависимой формой ГФА
Диета с пониженным
содержанием ФА
Умственная отсталость и тяжелые неврологические нарушения
Комбинированное лечение
диета с пониженным содержанием ФА
медиаторы
ВН4
Отсутствие неврологической симптоматики
21 слайд
Практическое применение
С помощью разработанной системы регистрации наиболее частых мутаций в гене PAH проведено:
216 диагностики гетерозиготного носительства мутаций в гене PAH:
162 диагностики провели для индивидов, не имеющих в семье больного ФКУ (планирование беременности):обнаружено 4 гетерозиготных носителя мутаций в гене PAH
54 диагностики в семьях больных ФКУ: обнаружено 26 гетерозиготных носителя мутаций в гене PAH
67 пренатальных диагностик, из них:
В семи случаях плод унаследовал те же хромосомы, что и
больной ребенок
В 46 случае плод являлся гетерозиготным носителем заболевания
В 14 случаях плод не унаследовал мутации в гене PAH
22 слайд
Диагностика недостаточности тетрагидробиоптерина:
Подтвержден диагноз «BH4 – зависимая форма ГФА», найдены мутации в гене PTS
Методом SSCP-анализа с последующим секвенированием проведена
Практическое применение
23 слайд
Повышенный уровень ФА,
клинические проявления ГФА
Молекулярно-генетическое исследование гена PAH с помощью системы обнаружения наиболее частых мутаций
Обнаружены обе мутации в гене PAH
Обнаружена одна мутация в гене PAH
Мутаций в гене PAH не обнаружено
Косвенная диагностика с использованием полиморфных маркеров, расположенных внутри и непосредственной близости от гена PAH
SSCP-анализ всей кодирующей последовательности гена PAH и областей интрон-экзонных соединений
Обнаружены обе мутации в гене PAH
Обнаружена одна мутация в гене PAH
Мутаций не обнаружено
SSCP-анализ всей кодирующей последовательности и областей интрон-экзонных соединений генов PTS и QDPR
Семья информативна, возможно проведение пренатальной диагностики и выявление гетерозиготных носителей среди родственников
Схема молекулярно-генетической диагностики гиперфенилаланинемии
69,2%
100%
Рабочие листы
к вашим урокам
Скачать
6 626 985 материалов в базе
Настоящий материал опубликован пользователем Парфенова Галина Викторовна. Инфоурок является информационным посредником и предоставляет пользователям возможность размещать на сайте методические материалы. Всю ответственность за опубликованные материалы, содержащиеся в них сведения, а также за соблюдение авторских прав несут пользователи, загрузившие материал на сайт
Если Вы считаете, что материал нарушает авторские права либо по каким-то другим причинам должен быть удален с сайта, Вы можете оставить жалобу на материал.
Удалить материалВаша скидка на курсы
40%Курс профессиональной переподготовки
600 ч.
Курс профессиональной переподготовки
300/600 ч.
Курс повышения квалификации
72/180 ч.
Мини-курс
6 ч.
Мини-курс
3 ч.
Оставьте свой комментарий
Авторизуйтесь, чтобы задавать вопросы.